Andrew Whitfield est né le 17 octobre 1971 à Amlwch, sur l'île d'Anglesey au Pays de Galles. Il grandit dans un cadre paisible avant de poursuivre des études supérieures en ingénierie civile à l'université Sheffield Hallam en Angleterre. Durant sa jeunesse, il ne se destine pas immédiatement aux métiers du spectacle et commence par exercer son métier d'ingénieur.

En 1999, il prend la décision de s'installer en Australie pour y poursuivre sa carrière d'ingénieur en bâtiment. C'est après son arrivée à Sydney qu'il commence à suivre des cours de comédie et à se lancer parallèlement dans le mannequinat. Son physique athlétique et son charisme lui permettent de décrocher ses premiers rôles à la télévision australienne à partir de 2004.

Au fil des années 2000, il apparaît dans plusieurs séries télévisées populaires en Australie. On le retrouve notamment dans des productions telles que All Saints, Packed to the Rafters, The Strip ou encore McLeod's Daughters. Ces apparitions lui permettent de se faire remarquer par des directeurs de casting régionaux.

Sa carrière franchit une étape importante lorsqu'il décroche le rôle principal dans le film de science-fiction fantastique australien Gabriel, sorti en 2007. Sa prestation d'un archange luttant contre les forces des ténèbres lui vaut de vives louanges et assoit son statut d'acteur montant. Il joue ensuite dans le thriller australien The Clinic sorti en 2010.

La consécration internationale arrive en 2010 lorsqu'il est choisi pour incarner le rôle-titre de la série américaine Spartacus : Le Sang des gladiateurs (Spartacus: Blood and Sand). Son interprétation d'un guerrier thrace devenu gladiator légendaire captive le public mondial. La série rencontre un succès phénoménal et propulse l'acteur au rang de star internationale.

En mars 2010, alors que la production s'apprête à tourner la deuxième saison de la série, un contrôle médical de routine révèle qu'il est atteint d'un problème de santé grave. Un diagnostic de淋巴肿 (linfome non hodgkinien) est posé, le contraignant à interrompre ses projets professionnels pour suivre un traitement de chimiothérapie.

Après une période de rémission temporaire durant laquelle il envisage de reprendre son rôle, la maladie récidive de manière plus agressive vers la fin de l'année 2010. Il décide alors de se retirer définitivement de la série pour se consacrer pleinement à son combat aux côtés de sa femme Vashti et de leurs deux enfants à Sydney.

Andrew Whitfield est décédé le 11 septembre 2011 à Sydney, en Australie, à l'âge de 39 ans des suites de son cancer. Concernant ses obsèques, sa famille a fait le choix de la plus stricte intimité : il a été incinéré à Sydney et le lieu exact où reposent ses cendres ainsi que le cimetière éventuel n'ont jamais été divulgués publiquement par ses proches.